血片、骨髓片制备

　 血片、骨髓片制备

　血片、骨髓片标本制备中，有直接检查法与许多细胞化学检查法，通过辨认细胞形态特征并结合临床资料，一般可做出正确诊断。为了达到这一目的，首先应做好血涂片、骨髓涂片和端氏染色，这是成功的关键。

　一、准备工作：

　（一）清洁玻片：玻片须边缘光滑，十分清洁干燥，不带有油质，新玻片要先浸在清洁液（重铬酸钾 2 份，硫酸 3 份，水 25 份）内，除去游离碱质（否则染色偏碱，不适于观察），用自来水冲洗，再浸在 70％酒精内，用时取出，并在火焰高处烘干。旧的玻片要先用肥皂水煮 10 余分钟后，再用温水冲洗干净。边缘玻碎、玻面有划痕的不能再用。因手上带有油渍，在取用玻片时只可用两手指挟住玻片的两边，不可触及玻面。

　（二）推片：推片推端要光滑（常用凹玻片做推片）并将其中锐角用镊子掰掉 lmm 左右（既宽度较载片窄 2~3mm），在油石上平磨光滑。因异常细胞如瘤细胞等，体积大比重轻，只在涂片边缘尾端才易找到，如涂膜宽至边缘，容易漏诊。

　二、制片方法：

　用推片蘸取骨髓液或血液少许（若看上去很浓，蘸量要少；如果稀薄，可多蘸些），置于载物玻片右端 1／3 处（右端空白处留贴标签），放直径1~2mm 大小的血液或骨髓液一滴，使推片和此滴血液或骨髓液接触，当血液或骨髓液扩散成一均匀的粗线（亦可来回或左右移动推片，使之成为一粗线）。然后使推片与载玻片成 30~45°角（骨髓液较浓时，角度要小，推的速度要慢；骨髓液较稀时，角度应大，推速要快），自右向左，均匀地向前推，直至玻片的尾部，尾部应结束在载玻片左侧 1／6 处。上述制作过程应尽快完成，否则骨髓液凝固，将影响标本质量。

　三、注意事项：

　（一）玻片：玻片洁净，手指不能触及玻片面，将玻片一张一张地摆开，准备 5 张以上。

　（二）推片：如置于载片上的血滴液或骨髓液滴较小，应推得较慢，且成＜30°角时涂片较薄；如血滴或骨髓滴较大，应推得较快，且成＞30°角时涂片较厚。推时要注意用力均匀，动作不快不慢，不可复推。

　（三）涂片：一张好的涂片应该厚薄均匀，分头、体、尾三部，尾部呈弧形，上下两边整齐（最好留出 1～2mm 的空隙）。于显微镜下观察时，各类有核细胞分布均匀，红细胞互下重叠，而又不太分散者，为最佳涂片。

　（四）涂片张数：抽出骨髓后应迅速涂片 5 张以上，涂片应薄而匀。同时涂血片 2～5 张作为对照用和细胞化学染色等。

　（五）染色：髓片染色时，先染 2 张，方法基本与血片染色相同，但染色液应稍淡，时间应稍长些。其余的涂片留做细胞化学染色用。

　（六）晾干涂片：涂好骨髓片后，应立即拿起标本，在空气中来回摆动，使之快干，以免细胞皱缩而形态变异，但不能在火焰上烘烤。

　（七）骨髓液不宜用抗凝剂：尤其是双草酸盐抗凝剂易使细胞发生自溶现象，使核致密、变形、细胞内出现草酸盐结晶等。必要时可用肝素抗凝。

　（八）死后涂片：死亡后半小时内可采取骨髓液制作涂片，此时细胞已有改变，但不影响诊断。